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Reportergen

Ein Reportergen ist ein Gen, mit dessen Hilfe die Expression anderer Gene verfolgt werden kann. Das Reportergen wird dabei meistens nach dem zu untersuchenden Gen, unter demselben Promotor eingeführt. In manchen Fällen ist auch die Aktivität des Promotors an sich von Interesse, ohne ein Zielgen. Dabei wird ein Reporterenzym, ein fluoreszentes Reporterprotein oder ein detektierbares Antigen gelegentlich auch als Fusionsprotein exprimiert. Fluoreszente Reportergene sind besonders in der Fluoreszenzmikroskopie von Bedeutung.

Inhaltsverzeichnis

In den entsprechenden Reportersystemen werden die cDNAs für diese Proteine in geeignete Expressionsvektoren kloniert.

Die cDNA-Sequenz des β-Glucuronidase (GUS)-Enzyms wird hinter die Promotorsequenz des zu untersuchenden Gens gehängt, und dann in eine Pflanze transformiert. Je nach Art des Promotors wird dann in verschiedenen Zelltypen, Entwicklungsstadien oder Umweltbedingungen Glucuronidase exprimiert, die nach Zugabe des künstlichen farblosen Substrates X-Gluc einen blauen Farbstoff herstellt. Mit diesem System kann man Genexpression auf Organ-, Gewebe- und Zellebene verfolgen.

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Reportergen
reportergen, verfolgung, expression, anderer, gene, sprache, beobachten, bearbeiten, dessen, hilfe, expression, anderer, gene, verfolgt, werden, kann, wird, dabei, meistens, nach, untersuchenden, unter, demselben, promotor, eingeführt, manchen, fällen, auch, a. Reportergen Gen zur Verfolgung der Expression anderer Gene Sprache Beobachten Bearbeiten Ein Reportergen ist ein Gen mit dessen Hilfe die Expression anderer Gene verfolgt werden kann Das Reportergen wird dabei meistens nach dem zu untersuchenden Gen unter demselben Promotor eingefuhrt In manchen Fallen ist auch die Aktivitat des Promotors an sich von Interesse ohne ein Zielgen 1 Dabei wird ein Reporterenzym ein fluoreszentes Reporterprotein oder ein detektierbares Antigen gelegentlich auch als Fusionsprotein exprimiert Fluoreszente Reportergene sind besonders in der Fluoreszenzmikroskopie von Bedeutung Inhaltsverzeichnis 1 Bekannte Reportersysteme 2 Beispiel aus der Pflanzenphysiologie 3 Literatur 4 Siehe auch 5 EinzelnachweiseBekannte Reportersysteme Bearbeitendas cat Gen codiert fur eine Chloramphenicol Acetyltransferase CAT das gfp Gen aus Aequorea victoria codiert fur ein Grun fluoreszierendes Protein GFP das gusA Gen aus Escherichia coli codiert fur eine b Glucuronidase GUS fruher bekannt als uidA Gen das lacZ Gen aus Escherichia coli codiert fur eine b Galactosidase b Gal meistens zur Blau Weiss Selektion die Luciferase Gene aus Photinus pyralis und Renilla reniformis codieren fur Biolumineszenz Enzyme das Luciferase Gen aus Oplophorus gracilirostris einer Tiefseegarnele codiert fur ein Biolumineszenz Enzym NanoLuc ist die gentechnisch optimierte 19 kD Untereinheit der Oploporus Luciferase 2 das Gaussia Luciferase Gen aus Gaussia princeps einem Ruderfusskrebs codiert fur ein Biolumineszenz Enzym 3 das Aequorin Gen aus biolumineszenten Quallen der Gattung Aequorea codiert fur ein Photoprotein das als Calciumsensor eingesetzt wird 4 das phoA Gen aus Escherichia coli codiert fur eine Alkalische Phosphatase AP In den entsprechenden Reportersystemen werden die cDNAs fur diese Proteine in geeignete Expressionsvektoren kloniert Beispiel aus der Pflanzenphysiologie BearbeitenDie cDNA Sequenz des b Glucuronidase GUS Enzyms wird hinter die Promotorsequenz des zu untersuchenden Gens gehangt und dann in eine Pflanze transformiert Je nach Art des Promotors wird dann in verschiedenen Zelltypen Entwicklungsstadien oder Umweltbedingungen Glucuronidase exprimiert die nach Zugabe des kunstlichen farblosen Substrates X Gluc einen blauen Farbstoff herstellt Mit diesem System kann man Genexpression auf Organ Gewebe und Zellebene verfolgen Literatur BearbeitenS R Kain amp S Ganguly Overview of Genetic Reporter Systems In Current Protocols in Molecular Biology Mai 2001 Chapter 9 Unit 9 6 PMID 18265284 H A Shuman amp T J Silhavy The art and design of genetic screens Escherichia coli In Nat Rev Genet Band 4 2003 S 419 31 PMID 12776212Siehe auch BearbeitenMarkergenEinzelnachweise Bearbeiten Bat Erdene Jugder Jeffrey Welch Nady Braidy Christopher P Marquis Construction and use of aCupriavidus necatorH16 soluble hydrogenase promoter PSH fusion togfp green fluorescent protein In PeerJ Band 4 26 Juli 2016 ISSN 2167 8359 doi 10 7717 peerj 2269 peerj com abgerufen am 1 November 2017 M P Hall J Unch B F Binkowski M P Valley B L Butler M G Wood P Otto K Zimmerman G Vidugiris T Machleidt M B Robers H A Benink C T Eggers M R Slater P L Meisenheimer D H Klaubert F Fan L P Encell K V Wood Engineered luciferase reporter from a deep sea shrimp utilizing a novel imidazopyrazinone substrate In ACS chemical biology Band 7 Nummer 11 November 2012 S 1848 1857 doi 10 1021 cb3002478 PMID 22894855 PMC 3501149 freier Volltext B A Tannous D E Kim J L Fernandez R Weissleder X O Breakefield Codon optimized Gaussia luciferase cDNA for mammalian gene expression in culture and in vivo In Molecular therapy the journal of the American Society of Gene Therapy Band 11 Nummer 3 Marz 2005 S 435 443 doi 10 1016 j ymthe 2004 10 016 PMID 15727940 H Tanahashi T Ito S Inouye F I Tsuji Y Sakaki Photoprotein aequorin use as a reporter enzyme in studying gene expression in mammalian cells In Gene Band 96 Nummer 2 Dezember 1990 S 249 255 PMID 2269434 Abgerufen von https de wikipedia org w index php title Reportergen amp oldid 211307362, wikipedia, wiki, deutsches

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